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合作信息

合作標題：檢測禽流感新城疫膠體金試紙盒
合作內容：禽病膠體金快速診斷產品說明

一．膠體金應用背景
隨著世界范圍內畜禽業的養殖規模不斷擴大，動物傳染病危害隨之加劇。有效防治疾病的關鍵是快速準確地診斷致病原，及時采取有效的預后措施。因此畜禽養殖業亟需適宜的快速診斷試劑。我國畜禽疾病防治采取以疫苗免疫為主的綜合措施，但實際生產中常出現免疫失敗，導致疫病流行。因此，快速準確地檢測畜禽的免疫抗體水平在疾病防治中就顯得越發重要了。
    隨著生物技術的進步，國內外獸醫專家研究開發了多種檢測方法，如ELISA、Dot-ELISA、間接血凝法、病毒分離、RT-PCR、免疫熒光等方法。但是這些方法需要設備比較齊全的實驗室及較高水平的專業人員操作。檢測過程繁雜，檢測時間較長，檢測成本也偏高。在國家財政支持下，這些方法正普及到國內地區市級獸醫站等單位，而那些缺少儀器設備和專門技術人員的基層獸醫站及畜禽養殖場，更需要快速準確的現場診斷試劑，膠體金試紙就是最能滿足用戶需要的產品。

二、膠體金試紙特點
⒈加樣簡單，操作簡便，非專業人士經過簡單培訓即可操作；
⒉特異性強、具備ELISA試劑同樣的抗體抗原材料及反應原理，敏感性可達到ELISA水平．如果結合銀染色能有更高的敏感性；
⒊單份樣品即可檢測，試劑和樣品用量極小，可以低至1～2μL。特別適合現場檢測，無需熒光顯微鏡和酶標檢測儀等儀器，非常適合現場使用；
⒋檢測時間大大縮短，試紙反應迅速，樣品加入后，一般5～10分鐘內即可判讀結果；
⒌穩定性好，試紙產品是干法試劑，常溫保存即可。沒有有害物質(如放射性同位素、鄰苯二胺等)的參與；
⒍多聯診斷試紙，即在同一條膜上可以同時檢測多種抗原（抗體），大大提高了檢測效率，同時也降低了檢測成本。
⒎膠體金快速檢測試紙可在現場操作，容易被消費者及監督、檢驗部門所接受，能取得較大的經濟效益和社會效益。

三、研究所簡介
本所由世界禽病學會會員、韓國RapiGen生命科學研究所（特聘外籍）研究員劉會芳先生與多位長期工作在生產和科研第一線的中青年專家創辦，以河北省農科院、河北農業大學、河北科技師范學院等科研院所為依托，與韓國RapiGen生命科學研究所緊密合作，利用當今國際新技術與雙方共同研發的高新產品服務于我國畜牧事業，為養殖業保駕護航。研究所主要工作如下：
利用單克隆抗體（德國Koehler、丹麥Jerne和阿根廷Milstein獲84年諾貝爾獎）、膠體金標技術（美國Faulk和Taylor已多次獲諾貝爾獎提名）、免疫色譜學等理論。研發成功畜禽用膠體金快速診斷試紙盒。家禽主要是新城疫、禽流感并能將流感分型。其一條試紙能測多個病毒為世界首創。目前正根據我國豬病診斷的迫切需要加緊研發豬瘟、藍耳病、圓環病毒等病毒的快速診斷試紙。另外相關病毒的抗體測定試紙盒已有部分研發成功，正在進行最后的測定工作。
針對家禽大腸桿菌病頑固、沙門氏菌病（雞白痢傷寒）漫延、里氏桿菌（鴨漿膜炎）猖獗的情況，研究所開發成功了新的自家疫苗制造方法。新方法根除了新的疫苗副作用大的缺點，其內毒素含量僅為以前疫苗的幾十分之一。新疫苗在能引起家禽體液免疫的同時，還能引起細胞免疫，為解決家禽業的老大難問題找到了新的方法。其技術為世界領先。
從事新型聚合酶擴增技術（美國Kary Mullis因發明此技術獲93年諾貝爾獎）的研發和應用，與韓國合作正在研發一次能測出十到三十個病的雞、豬、犬等畜禽的高密度和低密度基因芯片。已有部分產品出品。
針對流行疾病，應用、研發和生產相應的化學藥物。研發其最佳組合和最新應用。
本企業的膠體金試紙已經在市場流通2～3年，效果較好。其產品是與韓國協作生產。主要利用的韓國的金標技術。（注：韓國的金標技術和試紙生產技術在全世界名列第一）普通的病毒檢測工作要7～8天才發現病毒，但是采用試紙只需要15～20分鐘即可。膠體金的行業標準目前在中國沒有，所有的標準都只有在國外有，比如本所的行業標準就是韓國的，自身只有幾個檢測產品的質量指標。比如檢測標準為0.031個血凝單位為檢測標準，采用活病毒或疫苗進行產品檢測。對于活病毒的檢測是稀釋1000～10000倍。現今膠體金的試紙生產主要集中在河南，上海和武漢。但是標記技術都不太成熟，而韓國的技術較好，但是其缺乏英文版本，需要掌握韓語的技術人員。
石家莊市神九畜禽疾病防治及藥物研究所與韓國瑞捷（RAPIGEN）研究所合作并在世界上首次推出新城疫（NDV）+禽流感（AIVH1～15）、禽流感（AIVH1～15）+禽流感（AIVH5）病毒快速診斷試紙。該項目由國際上膠體金方面頂尖科學家樸在九(Jae-Ku Park)醫學博士主持，可使雞場提前5～10天探知瘟疫的侵入，在發病時能迅速判斷是新城疫還是流感、是流感時又能分出是否是H5型的，解決了行業內的一大難題，非常適合中國需要。相關產品如下：
1、NDV + AIV（H1～15定性）快速診斷試紙
2、AIV（H1～15定性）+ AIV（ H5分型）快速診斷試紙
3、NDV 快速診斷試紙
4、AIV（H1～15定性）快速診斷試紙
5、AIV（ H5分型）快速診斷試紙

四、產品設計原理
禽用膠體金快速診斷試紙是利用膠體金原理和免疫層析原理來實現捕捉野毒的。
膠體金是俗稱金子的金屬金的水溶膠。膠體金標記技術是以膠體金作為示蹤標志物或顯色劑，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。
免疫層析法 (Immunochromatography)是九十年代興起的一種基于免疫膠體金技術的快速診斷技術，其原理是將單克隆抗體與膠體金結合，置于聚脂膜中；加樣后，如樣品中有病毒，則金標抗體與部分病毒結合在毛細現象的作用下向上流動，遇到固定在硝酸纖維膜上的抗體時便生成“金標抗體/抗原/抗體”夾心免疫復合物從而聚集顯色（檢測線陽性），另一部分沒與抗體結合的金標抗體與病毒結合物和隨液體向上流動，遇抗抗體時形成“抗抗體/金標抗體/抗原”復合物顯色（質控線）；當樣本中不含病毒時，則不形成“金標抗體/抗原/抗體”夾心免疫復合物不顯色（檢測線陰性），但抗抗體與金標抗體復合物仍顯色（質控線），從而實現特異性的免疫診斷。該技術與以往常規診斷方法相比具有以下突出優點
•  快速：全部檢測過程僅需 5～30分鐘。
•  準確：比酶聯免疫吸附測定（ELISA其設備5萬元）準確度高，與聚合酶擴增技術（PCR其設備百萬元）相近。
•  簡便：不需其它任何儀器設備，操作也極其簡單，可隨時隨地進行,也不需要專業臨檢人員操作，而且攜帶方便，基層可以開展。
•  穩定性好：金標試劑穩定，2~30℃可長期保存。
•  檢測標本種類多：泄殖腔內容物、糞便、氣管粘液等。

五、產品模式圖

圖二 rapid test 模式圖

圖三結構圖：

反應模式圖：(以人的HCG為例)

六、產品參數及使用

1、禽流感病毒（AIV）+新城疫病毒（NDV）聯合抗原檢測試紙
•檢測：所有禽流感含H1~15所有亞型和新城疫病毒（包含大量變異株）。
•檢測發布時間：2009/3/2 11:47:00

聯系方式

單位名稱：	魏晗
聯系電話：	0311-86800209
傳真：
聯系手機：	15803214536
聯系人：	劉軍同
網址：	http://
聯系 QQ：	359547702
電子郵箱：	liujuntong268@163.com
郵編：	058000
地址：	河北石家莊和平西路598號

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